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Ajinomoto

Ajinomoto(味之素)成立于1909年,总部位于日本东京,是一家氨基酸原料供应商,氨基酸均采用发酵法生产,不含化学合成的副产物以及化合物杂质,产品质量高且供应稳定,在cGMP条件下生产的氨基酸能够满足医药级别、抗体辅料等使用条件的需求。作为氨基酸龙头企业,味之素利用培养基重要原料氨基酸供应链的优势,持续开展以CHO为首的生物制药培养基的开发、生产和销售。2014年,味之素韩国子公司Ajinomoto Genexine(现更名为Ajinomoto CELLiST Korea) 在韩国建立符合cGMP规范的培养基工厂,生产CELLiST细胞培养基用于培养CHO细胞株,同时提供培养基CMO服务,为生物制品的生产提供了“多合一”的解决方案。目前,Ajinomoto(味之素)与第一三共、中外制药等大型药企建立深度的合作关系,年产能约200吨,定制培养基管线数量达40+,其中,包括27+条前期临床管线 ,12+条临床管线以及5条已上市管线。

产品信息

Ajinomoto(味之素)

Ajinomoto(味之素)CELLiST细胞培养基的成分组成清晰,无动物源性成分,且适用于所有CHO细胞系。CELLiST系列包括基础培养基(CELLiST BASAL 3、CELLiST BASAL 10、CELLiST BASAL CHO MX)、补料培养基(CELLiST FEED2、CELLiST F7)以及补剂(半胱氨酸补充剂Cys1、半胱氨酸补充剂Cys2、甘氨酰-L-酪氨酸二肽),能够支持细胞的高密度生长,同时提高蛋白产量。


1、CELLiST BASAL3 & FEED2培养基

CELLiST BASAL3基础培养基和FEED2补料培养基共用时,能够为CHO细胞系提供更加稳定、高产的蛋白质生产所需的营养物质。

产品特性:

· 无动物源性成分、无水解物、无蛋白质、无提取物或其它不明成分,具有明确的组成成分

· 适合于CHO-GS、CHO-K1、CHO-S及CHO-DG44等所有CHO细胞系

· 适合于batch、fed-batch、perfusion所有规模的细胞培养方式

· 在细胞成长和蛋白质生产等领域均具有很高的性能

· 批量生产和测试样品均可使用

· 灵活的应用程序,可轻松替换现有的培养基平台

· cGMP级别工厂生产

· CELLiST FEED培养基和CELLiST BASAL3并用时可表现较好的性能补料培养基,也可以和其他任何制造商的基础培养基并用


CELLiST BASAL3 产品特点:

CELLiST BASAL3基础培养基提供较为平衡的氨基酸及其它营养成分,以保证细胞合适的成长条件和高生产效率。CELLiST BASAL3具有明确的组成成分,且不含动物源性成分。


CELLiST BASAL3 产品特点


CELLiST FEED2产品特点:

CELLiST FEED2补料培养在fed-batch工程中须从第3天或第4天开始,或者在perfusion工程中和基础培养基同时添加。FEED2富含氨基酸,对细胞培养的快速成长和生产阶段起到辅助性作用。


CELLiST BASAL3 产品特点


CELLiST BASAL3 & FEED2培养基性能展示:

CELLiST培养基和其他全球有名的培养基产品性能对比:在Ambr 15微生物反应器系统中,使用表达IgG1抗体的CHO-K1系进行补料分批处理。数据结果显示,BASAL3 & FEED2共用时能够有效提高细胞的生长密度以及蛋白质的生产量。

CELLiST BASAL3 & FEED2培养基性能展示

备注:A、B、C和D代表来自主要培养基厂商的基础/补料组合,培养和补料方式根据每个厂商的建议进行。


BASAL3产品规格

BASAL3产品规格


FEED2产品规格

FEED2产品规格


2、CELLiST F7 补料培养基

CELLiST F7补料培养基利用CHO分批补料工艺,实现较好性能,并提高生产率。CELLiST F7补料培养基是一款成分清晰、不含动物源性的培养基,采用良好配方,利用味之素株式会社专有的半胱氨酸控制技术,使CHO细胞实现高蛋白质表达。在研发进程中,使用了生物模拟、多组学和人工智能技术来优化培养基成分,着重提高了特定代谢途径(如三羧酸循环)的效率。CELLiST F7补料培养基专门设计与BASAL3、BASAL10和CHOMX等ELLiST生长培养基搭配使用,但也可与其他任何市售培养基一起使用。CELLiST F7补料培养基为一款单一剂型高性能培养基,使用便捷,适用于多种CHO细胞系,可用于生物制药过程中的多个阶段。


CELLiST F7产品特点:

· 采用味之素自有的半胱氨酸稳定技术,提高了培养基中可被利用的半胱氨酸浓度,从而提升培养基性能,并且能够在中性pH值的条件下,轻松实现单一补剂的简单补料过程。

· 通过与新加坡科技研究局生物处理科技研究院(BTI)合作,利用“数字孪生”技术对氨基酸和其他培养基成分进行优化,提高了工艺性能。


CELLiST F7性能:

· 成分组成清晰、无蛋白质、无动物源性成分

· 单一试剂补料,在中性pH值下易溶解,无需额外增加补料管线

· 适用于所有CHO细胞系,包括CHO-K1、CHO-GS、CHO-DG44和CHO-S

· CELLiST F7可与任何市售的基础培养基结合使用(但为获得较好的效果,建议将CELLiST F7搭配CELLiST基础培养基使用)


背景介绍

CELLiST F7培养基采用味之素集团专有的半胱氨酸稳定技术,确保CHO细胞在整个培养过程中持续获得高浓度的半胱氨酸,从而提高细胞性能。这是通过大幅减少L-半胱氨酸向L-胱氨酸生物自然氧化过程实现的。CELLiST F7中含有较高浓度的半胱氨酸,但同时保证了半胱胺的稳定性和保质期。

半胱氨酸浓度增加

上图显示,在可用的半胱氨酸浓度增加50%之后,性能增加>20% (ambr15,CHO-K1细胞系)。


CELLiST F7性能展示:

CELLiST F7补料培养基和CELLiST BASAL3基础培养基的搭配使用方案与常用的商业培养基品牌产品进行了对比,其中采用了Ambr15分批补料过程。从第3天到第11天,每隔一天添加一次CELLiST F7补料培养基,体积比为6%(V)。其他培养基品牌的补料方式,则遵循制造商的建议,细胞系分别为CHO-K1和CHO-GS。


CHO-K1 cell line

CELLiST BASAL3培养基与CELLiST F7补料培养基搭配使用,采用分批补料培养方式的测试结果。数据显示,相比于其他补料,CELLiST F7的活细胞密度和滴度浓度表现较优。

CHO-K1 cell line


CHO-GS cell line

CELLST BASAL3 基础培养基与CELLiST F7补料培养基搭配使用,采用分批补料培养方式的测试结果。数据显示,相比于其他补料,CELLiST F7的活细胞密度和滴度浓度表现较好。

CHO-GS cell line


CELLiST F7产品规格

CELLiST F7产品规格


3、氨基酸补充剂半胱氨酸1/半胱氨酸2

在培养基中,两分子半胱氨酸易氧化形成胱氨酸,由于其溶解度较低,因此会发生沉淀。味之素氨基酸补充剂添加了稳定剂,半胱氨酸和稳定剂之间可以可逆结合和分离,如果是连接的状态则半胱氨酸表现稳定。当溶液中半胱氨酸浓度降低时,半胱氨酸可以解离成游离状态,从而被细胞充分吸收和利用。因此,味之素的半胱氨酸补充剂抑制了胱氨酸的形成/沉淀并提高了培养基中的Cys的浓度,验证数据见下图。


氨基酸补充剂半胱氨酸1/半胱氨酸2的机制

氨基酸补充剂半胱氨酸1/半胱氨酸2的机制


在培养基储存过程中胱氨酸的浓度

在培养基储存过程中胱氨酸的浓度


氨基酸补充剂半胱氨酸1产品特性:

· 组成成分清晰

· 不含动物源成分

· 不含水解物,提取物或其他不明成分

· 可不含蛋白质,如生长因子

· 可不含谷氨酰胺源,碳酸氢钠,或泊洛沙姆

备注: 氨基酸补充剂半胱氨酸1可以添加到任意单剂补料产品中


氨基酸补充剂半胱氨酸2产品特性:

· 组成成分明确

· 不含动物源成分

· 不含水解物,提取物或其他不明的成分

· 不含蛋白质,如生长因子

· 不含谷氨酰胺源,碳酸氢钠,或泊洛沙姆

备注: 氨基酸补充剂半胱氨酸2用于替代双剂补料产品中的小补料组分(高pH组分)


效价提高性能展示:

在CHO细胞培养过程中,添加氨基酸补充剂半胱氨酸1/半胱氨酸2后,可以通过抑制胱氨酸形成延迟/沉淀提高培养基中的Cys源,使效价得到有效增加。


CHO-DG44细胞进行补料培养方式

备注:用CHO-DG44细胞进行补料培养方式进行对比在第4、6、8、10和12天添加5.25%浓度的FEED2。


结果显示,CHO-DG44细胞培养过程增加氨基酸补充剂以后,效价提升了27%。


CHO-S细胞进行补料培养方式

备注:用CHO-S细胞进行补料培养方式进行对比。在第4、6、8、10、12天,向其他品牌的基础培养基中添加6%浓度的同品牌的补料培养基。


结果显示,CHO-S细胞培养过程增加6%浓度的氨基酸补充剂以后,效价提升了11%。


CHO-S细胞进行补料培养方式

备注:用CHO-S细胞进行补料培养方式进行对比。在第4、6、8、10、12天,向其他公司的基础培养基中添加4.5%浓度的同品牌的补料培养基。


结果显示,CHO-S细胞培养过程增加4.5%浓度的氨基酸补充剂以后,效价提升了5%。


总之,在不同类型细胞中添加氨基酸补充剂半胱氨酸1/半胱氨酸2后,细胞效价都得到了有效提高。


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