LentiBOOST Pharma grade

  • 品牌:Sirion Biotech

  • 品名:LentiBOOST Pharma grade

  • 型号:SB-A-LF901-01

  • 规格:100mg/mL,1mL/管

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产品简介

LentiBOOST是德国Sirion Biotech 开发的一种高效、无细胞毒性的慢病毒转导增强剂,用于临床前和临床的慢病毒载体转导。它是一种非离子型、非受体依赖性的表面活性剂,通过降低细胞膜粘稠度、提高脂质交换和跨膜转运,促进慢病毒与细胞膜的融合,提高慢病毒转导效率。

目前LentiBOOST慢病毒转导增强剂在美国和欧洲已有30多个药物phase III/II/I临床实验中,并有相关药物已上市销售。


产品特点

  1.增强慢病毒转导效率,可高达90%—提高治疗蛋白表达量,有利于取得临床试验成功

  2.减少MOI低至2倍,从而降低COGS(Cost of goods sold)——减少Lentivirus的用量和物料成本

  3.控制单个细胞中的病毒载体拷贝数(VCN,Virus Copy Number)——符合FDA/EMA对ATMPs(Advanced Therapy Medicinal Products)产品的安全标准

  4.易于使用——无需改变现有转导流程,兼容已经开发流程

  5.提供研究级和GMP级——GMP级具有临床试验的所有必备文件

  6.30多种应用LentiBOOST的药物已在美国和欧洲进入临床试验(Phase III和Phase I/II)阶段——加速了IND文件归档


注:研究级(phama grade)仅适用于早期研发和工艺优化阶段,不建议临床阶段使用。

  另有GMP garde支持临床申报及商业化生产,货号SB-A-LF-900-01。


作用原理

应用领域

LentiBOOST可广泛应用于多种临床相关细胞类型,包括CD34+造血干细胞(HSCs),间充质干细胞(MSCs),神经干细胞,原代T细胞,NK细胞和成纤维细胞等,对于难转导的小鼠T细胞亦有效。已成为改进体外基因治疗和CAR-T细胞治疗的临床转导方案的理想选择。


客户体验


LentiBOOST提高慢病毒转导效率





LentiBOOST无细胞毒性,不影响细胞增殖和分化




LentiBOOST控制单个细胞中载体拷贝数,符合EMA/FDA对基因改造细胞治疗的安全原则


建议转导步骤

第1天: 种细胞

参考表格的细胞密度进行种板(注意:如果细胞维持在某种选择压力下,种板时需要去除用于筛选的抗生素,直至维持到第3天 )


第2天: 病毒转导

总原则:对于第一次实验,建议使用2-30之间的MOIs进行病毒转导(如下实验步骤以MOI 10举例),并将LentiBOOST-P以1:100的标准浓度添加到总体积(培养基+病毒)。

在第二次实验中,建议在1:20-1:1000范围内滴定LentiBOOST-P用量,以确定最小活性浓度。(各组分用量仅供参考,实际最佳转导条件以实验室优化结果为准)

1.4°C复苏慢病毒

2.在细胞中直接加入计算好的LentiBOOST-P体积量,轻轻混匀

3.按下表计算所需慢病毒颗粒用量,并加入细胞培养基中,轻轻混匀

4.Spinoculate(可选):室温800g离心培养板90分钟(注意: Spinoculation步骤被发现可对大多数细胞增加转导效率。必须使用细胞培养板进行离心,以减少剪切力)

5.正常培养条件过夜培养细胞


第3天: 更换培养基

移除含有病毒颗粒的培养基上清,更换成合适体积的正常培养基


第4天 : 维持培养

如果细胞汇合度较高,可在第四天稀释分板培养,后续按照常规流程进行培养基更换和细胞传代


第5天: 筛选稳定细胞系(可选)

利用慢病毒载体上的抗性筛选标记可筛选出稳定细胞系,事先需要进行杀伤曲线滴定合适的抗生素筛选浓度。(备注: 转导过程中请做好非转导阴性对照)

1.去除细胞中的培养基

2.加入含有一定浓度筛选抗生素的培养基

3.定期更换含有抗生素的培养基并持续培养细胞


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