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teknova

Teknova 于1996年在美国加利福尼亚州创立,公司专注于为科研、临床和应用市场提供生物加工、生物生产和分子诊断的关键试剂,主要业务为细胞培养基和补充剂、蛋白质和核酸纯化缓冲液以及分子生物学试剂的开发和生产,同时提供相关定制产品服务。Teknova在加利福尼亚州霍利斯特的占地面积达200,000 平方英尺以上,含有制造空间、洁净室和先进的设备, ISO 13485:2016 认证设施支持生产需求,可以提供即用型 GMP 级产品。2022 年 5 月,Teknova 被加州绿色商业网络认证为绿色企业。

产品信息

Teknova

Teknova产品线包括用于进行细菌、酵母和真菌培养基的琼脂板,用于酸碱、添加剂、酒精、洗涤剂、表面活性剂、盐溶液、生物缓冲液在内的多种缓冲液和试剂、用于添加剂、细菌真菌培养等方面的冻干粉、微生物培养基、PCR认证水、试剂水以及EFI级优质水等,同时还提供AAVTak解决方案,包括用于pcr扩增的试剂盒、AAV稳定剂以及AEX缓冲液筛选试剂盒。


1、细胞培养基

细菌培养基设计用于在受控环境中培养细菌。Teknova的培养基种类繁多,从LB、TB和SOC等标准培养基到化学成分明确、无动物成分和动物源性培养基。


2、缓冲液和试剂

Taknova具有超27年复杂的配方开发经验,可以提供各种高质量、县城缓冲液以及试剂。


3、干粉

Taknova干粉种类繁多,从预混培养基到琼脂、抗生素、X-Gal 和 IPTG 等原材料。它们可以用水快速复溶,并有多种形式可供选择,包括方便水合作用和混合的袋子。


4、微生物培养基

包括 LB、Terrific Broth 和 EZ 培养基。我们的即用型解决方案有管、瓶和袋装,包括您需要的抗生素,从羧苄西林到卡那霉素和氨苄西林。同时培养基无动物成分,质量控制严格,确保试验的可重复性。


5、AAV解决方案

AAV上游研究包括细胞扩增和转染、细胞裂解和核酸内切酶处理两个过程。下游研究包括过滤、捕获、抛光、存储这几个过程。

5.1 细胞扩增和转染试剂优化: 

TAKnova对传统的细胞扩增和转染试剂进行优化,新的试剂能够有效提升产品的性能,细胞生长质量以及AAV的产量都得到了进一步提升。

性能检测:

病毒生成细胞培养基检测

图 1:病毒生成细胞培养基检测


测试了五种不同的培养基类型用于细胞生长和 AAV 病毒生成。所有培养基类型均呈指数级增长,培养基类型A的细胞生长和AAV产量比其他的类型高。


转染试剂优化

图 2:转染试剂优化

小规模(30ml)测试了七种不同的转染试剂,以确定哪种试剂产生的AAV滴度比较好。在七种中,有四种被选中并放大(350毫升)用于AAV生产。试剂 F 在血清型中具有较好的 AAV 滴度。


高效的细胞裂解和核酸内切酶处理对于保持高 AAV 产量和纯度至关重要。Teknova已经验证了多种尺寸的细胞裂解缓冲液以及苯甲酸酶核酸酶,可减少与产品相关的杂质,如残留的宿主细胞DNA和质粒,以满足各种生物反应器需求。


5.2 细胞裂解和核酸内切酶试剂:

Teknova的哺乳动物细胞裂解缓冲液是一种基于聚山梨酯 20 的细胞裂解试剂,浓度为 10X。100 mL 体积足以收获 1 L 细胞培养物,500 mL 体积足以收获 5 L 细胞培养物。 


5.3过滤试剂:

Teknova通过使用与血清型无关的过滤缓冲液,保护 AAV 颗粒的完整性,同时去除颗粒污染物。Teknova的AAV过滤缓冲液既可以用作深层过滤膜的平衡缓冲液,也可以用作深层过滤膜的追逐缓冲液, AAV稳定剂可以降低过滤过程中的浊度和压力,防止聚集,并显著提高功能性衣壳的回收率。


5.4 捕获试剂:

获取 AAV 捕获步骤所需的所有亲和缓冲液和试剂,包括平衡、洗涤、CIP、储存、中和和电导率调节解决方案。Teknova的 AAV 亲和缓冲液试剂盒也可单独提供,通过使用 AAV 稳定剂,通促进色谱过程中的单分散和减少剪切压力引起的结构完整性损失,进而保护衣壳的完整性。


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