2024年1月,Iovance Biotherapeutics公司开发的TIL疗法lifileucel成功获批上市,用于治疗晚期黑色素瘤,为T细胞治疗实体瘤的细胞疗法迎来曙光。
与依赖血液循环实现治疗的细胞疗法相比,TIL的靶向特异性是该疗法的优势。TIL疗法利用患者自身的免疫系统来识别并攻击癌细胞,包括已经渗透到肿瘤中的特定免疫细胞,这类免疫细胞具有针对癌细胞的天然识别能力和攻击能力,通过提取、扩增并重新注入这些免疫细胞,可以有效增强患者的免疫反应,从而攻击并消灭肿瘤细胞。
然而,TIL的独特性在于能够从患者病灶切除肿瘤组织并进行细胞分离,这让获得TIL细胞并进行大规模生产变得更为困难,因此更需从肿瘤组织中分离出高质量的TIL细胞。性能温和的Collagenase被应用于从组织中提取单细胞,其中Nordmark Collagenase NB6 GMP已支持多款TIL疗法项目进入临床实验阶段。
NB6 GMP用于从实体瘤组织中提取TILs
肿瘤浸润性淋巴细胞(TIL)疗法的重点在于利用患者自身的免疫系统对抗癌症。此过程步骤之一是从实体瘤中提取高质量的TIL细胞。以下以胰腺肿瘤举例说明:
1、将手术中获取的胰腺组织转移到培养皿中;
2、添加5ml的Collagenase NB6 GMP溶液(0.2pzu/ml)于50ml离心管中(Tube A)并置于冰上;
3、添加适量Collagenase NB6 GMP溶液于培养皿中,覆盖胰腺组织即可;
4、用无菌手术刀和镊子将胰腺肿瘤切碎,使切碎的肿瘤组织长度不超过3mm;
5、将胰腺肿瘤组织碎片转移到Tube A中,确保所有组织碎片浸没在消化液中;
6、37℃,震荡孵育20min;
7、添加大于20ml的预冷PBS至Tube A中并混匀;
8、使用70μm细胞过滤器将Tube A中的溶液过滤并转移到新的50ml离心管中(Tube B);
9、Tube B于4℃,300g离心5min;
10、移除Tube B中的上清液,使用培养基重悬细胞;
11、细胞接种培养;
12、体外筛选特异性靶向胰腺肿瘤的TIL。
Nordmark胶原酶在组织解离中的应用范围
除上述应用外,Nordmark胶原酶可被应用于从不同组织类型中分离目的细胞,部分细胞类型如下表所示:
Nordmark提供高质量胶原酶NB产品,适用于各种组织类型的单细胞解离;Nordmark提供的GMP等级胶原酶产品,可进行临床用途的细胞解离;严格的生产标准保障可靠的批间一致性和优异的性能。
Nordmark胶原酶NB旨在获得高产量的活细胞,希望您能在上述表格中找到您希望分离的细胞类型。若您找不到您的应用或想了解更多信息,欢迎与我们联系!