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96孔微球板
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96孔微球板

  • 品牌:InSphero

  • 品名:Akura 96 Spheroid Microplate

  • 货号:CS-PB13 / CS-PB15

  • 规格:96孔微球培养板(5块/包,20块/包)

  • 目录价:询价

96孔微球板
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产品简介

InSphero Akura 96/384孔超低吸附细胞微孔板是一种简单、灵活且能兼容高通量和自动化系统的操作平台,用于无支架的3D细胞培养、观察和观测。每块InSphero Akura 96/384孔超低吸附细胞微孔板都是由超低吸附的培养孔和用于减少培养基蒸发的板盖组成。适用于永生或改良细胞系、原代细胞以及诱导性多能干细胞(iPS cells)等已知可以用于3D细胞培养的细胞类型形成类器官、细胞微球体或细胞微组织。此外,InSphero Akura 384孔细胞微孔板的底部是一层透气膜,可以保证长时间培养时充足的气体交换。


产品特色

InSphero Akura 96/384孔超低吸附细胞微孔板的独特设计可以帮助客户更好地开展高通量的体外3D细胞培养实验。从远处看,InSphero Akura 96/384孔细胞微孔板和普通的细胞微孔板的外观没有明显不同,尺寸符合SLAS/ANSI标准,可以完美兼容常规的实验操作以及仪器。


从近处观察,便可以发现其创新型设计的微妙之处:微孔板中的每个孔都拥有类似“倒置烟囱”的形状以及一个被称为“SureXchange ledge”的吸头停靠处以便于更换培养基。InSphero Akura 96孔细胞微孔板的吸头停靠处呈轴对称,而InSphero Akura 384孔细胞微孔板只有单侧的吸头停靠处。在更换培养基时,只需要将吸头的尖部停靠在这里,便能得到一个合适的触觉反馈,避免将吸头伸入过深的位置而对培养的细胞微球产生影响。微孔板的培养孔壁有一层耐用的涂层,可以有效防止细胞微球体在培养的过程中发生附着。


InSphero Akura 384孔细胞微孔板由24列、16行培养孔构成,列由数字1-24表示,行由字母A-P标识,孔A1标识整板左上角的孔,而P1标识整板左下角的孔,由A1和P1孔可以确定整块微孔板的方向(图2)。InSphero Akura 384孔细胞微孔板的培养孔结构是非对称的,吸头停靠处位于培养孔靠近微孔板上侧的位置,而供细胞微球体生长的空穴位于培养孔靠近微孔板下侧的位置。在使用InSphero Akura 384孔细胞微孔板时应特别注意微孔板的方向,避免不正当的操作对实验结果产生影响。


产品优势

1. 利用超低吸附的微孔板中便捷地获得细胞自聚集形成的细胞微球

2. 独特的培养孔设计使得更换培养基的过程更加轻松,可以有效避免细胞长期培养时因为更换培养基导致的细胞微球的丢失或损伤

3. 培养孔的底部设有直径为1mm的平底观察窗,可以方便地进行细胞微球的定位和观察,避免了一般圆底ULA板成像时的局部变形

4. InSphero Akura 384孔细胞微孔板可以与更先进的成像和自动化液体处理系统兼容以开展高通量实验,培养孔独特的黑色壁体可以有效消除孔间的荧光串扰


Akura 96 Spheroid Microplate关键参数        

参数Akura 96 Spheroid Microplate
板规格96 孔
板材COP
透光范围400–800 nm,约 92%
孔底厚度0.8 mm
最大孔体积280 μL
推荐接种体积70 μL/well
长期培养起始细胞数250–500 cells/well
大型/快速球状体≥2,500 cells/well
接种后离心250 RCF,2 min
球状体形成时间通常 2–5 天
推荐培养箱湿度>95% RH
推荐培养基体积50–70 μL/well
最大建议培养基体积80 μL/well
成像支持高内涵成像
自动化适合自动化液体处理


Akura 96 Spheroid Microplate 常见问题            

您可点击问题左侧三角箭头查看答案:

Q1:Akura 96 Spheroid Microplate 有哪些改进?

A1:新一代 Akura 96 Plate 主要在成像性能、自动化兼容性、减少蒸发和标准化规格方面进行了优化:

  • 采用 COP(环烯烃聚合物)材料,400–800 nm 透光率约 92%;

  • 孔底厚度从 1.3 mm 降至 0.8 mm;

  • 裙边高度降低至 0.4 mm,支持高 NA 物镜成像;

  • 整板平整度低于 80 μm,有利于自动化操作;

  • 定制低蒸发盖与板之间距离约 200 μm,有助于降低边缘孔蒸发;

  • 采用标准 SLAS 板高 14.35 mm;

  • 最大孔体积由 170 μL 提高至 280 μL。

Q2:使用 Akura 96 Plate 前为什么需要预润湿?

A2:预润湿可以帮助减少细胞接种过程中气泡的产生。

使用前,每孔加入 40 μL 培养基进行预润湿,然后将培养基完全吸除,孔底允许残留少量液体(通常小于 5–7 μL)。

Q3:Akura 96 Plate 可以培养所有类型的细胞吗?

A3:不能保证所有细胞都能形成球状体。

细胞是否能够形成 spheroid 与其来源组织、细胞形态、功能以及细胞分离过程有关。同一种细胞不同供体之间也可能存在差异。

对于新的细胞类型,建议通过调整细胞浓度、培养基组成、支持细胞或 ECM等条件进行优化。

Q4:每孔推荐接种多少细胞?

A4:需要根据细胞类型和实验目的进行优化:

  • 长期生长观察:建议从 250–500 个细胞/70 μL/孔开始;

  • 非增殖细胞或希望快速形成较大球状体:建议从 ≥2,500 个细胞/70 μL/孔开始。

对于新的细胞类型,建议测试不同接种密度以确定The best范围。

Q5:Akura 96 Plate 每孔的The best培养体积是多少?

A5:推荐每孔加入 70 μL细胞悬液。

接种时建议缓慢移液,速度低于 10 μL/sec,枪头靠近孔底但不要接触孔底。

同时,应在接种前轻柔混匀细胞悬液,使细胞均匀分布,有助于获得大小和细胞组成更加一致的球状体。

Q6:接种后为什么需要离心?

A6:接种后短时间离心可以:

  • 去除孔内气泡;

  • 促进细胞沉降至孔底;

  • 帮助细胞聚集并形成 spheroid。

推荐将盖子盖好后,在微孔板离心机中以 250 RCF 离心 2 分钟。之后放入 37°C、湿润的 CO₂ 培养箱中培养,一般 2–5 天可形成球状体。

Q7:如何更换培养基而不破坏或吸走球状体?

A7:Akura 96 Plate 每个孔内部设计有 SureXchange ledge,可作为移液枪头的定位点。

换液时,将枪头放在孔内的 ledge 位置,以较低的移液速度吸走培养基,可以减少球状体被吸走的风险。

吸液后孔内通常会保留约 5–7 μL培养液。

Q8:换液时应该加入多少新培养基?

A8:吸除旧培养基后,从 SureXchange ledge 位置加入 70 μL 新鲜培养基。

建议控制加液速度低于 50 μL/sec。使用自动化液体处理设备时,也可以通过调整枪头的垂直位置实现类似的换液效果。

Q9:如何减少 Akura 96 Plate 外圈孔的蒸发?

A9:低体积培养体系中,外圈孔蒸发是常见问题。严重蒸发可能导致培养基中的盐、血清等成分浓缩甚至析出,并影响球状体状态或改变药物的实际浓度。

建议:

  • 使用相对湿度 >95% 的培养箱;

  • 尽量减少培养箱开关门;

  • 每孔保持 50–70 μL培养基;

  • 如果湿度控制较差,可增加至最高约 80 μL;

  • 根据实际情况增加换液频率,例如每两天或每天换液;

  • 长期低频换液培养时,可使用 InSphero Incubox 减少边缘效应。

Q10:Akura 96 Plate 适合长期培养吗?

A10:可以。Akura 96 Plate 可用于长期球状体培养。

对于长期培养,特别是低频换液条件,需要特别关注培养箱湿度和外圈孔蒸发问题,以维持稳定的培养条件。

Q11:Akura 96 Plate 可以用于高内涵成像吗?

A11:可以。

该板针对成像进行了优化,可以与多种高内涵成像配合使用。不过,由于其孔底结构和 0.8 mm孔底厚度,部分成像系统可能需要重新建立相应的 96 孔板规格(plate definition/form factor)。

Q12:使用 Akura 96 Plate 成像时需要注意什么?

A12:成像时需要考虑:

  • 孔底厚度为 0.8 mm;

  • 孔底为非连续结构;

  • 可能需要扩大自动对焦范围;

  • 如果需要对整个 spheroid 的 Z 轴高度进行成像,物镜工作距离需要满足 0.8 mm + 样品 Z 高度;

  • 如果使用带校正环的物镜,应将其设置为 0.8 mm孔底厚度。

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