iPSC诱导多能干细胞研究解决方案

Cellular Engineering Technologies（CET）的人iPSC生长培养基支持灵活的换液策略，在每日和限制性补料条件下，iPSC细胞扩增表现优于市场主要竞品，并可将用户研发预算/成本降低20-40%。

iPSCs的维持培养通常采用一些标准定义的培养基，能提供iPSCs生长和增殖所需的适当条件，这对于细胞的生长状态、分化潜能、基因组稳定性以及进行后续的实验和应用非常重要。高质量、可重复且经济有效的培养对于大规模扩增用于细胞治疗的hiPSCs尤为重要。英国Qkine开发生产的热稳定FGF-2(bFGF)和TGF β1 PLUS用于iPSCs多能性的维持培养。

使用全长人重组层粘连蛋白底物可以为多能干细胞、成体干细胞和组织特异性细胞的体外培养重塑生理相关性较高的生长环境，甚至可以在3D培养体系中培养。瑞典BioLamina为各种2D和3D应用提供多种全长人类重组层粘连蛋白细胞培养基质组合，特别是LN521亚型，一种在天然干细胞环境中表达的关键蛋白，可用于iPSC的干性维持及扩增效率高。

在体外培养扩增iPSCs时，解离试剂的选择需要根据具体的实验需求来定。对于贴壁生长的iPSCs，常见的解离方法是使用含胰蛋白酶和/或EDTA的溶液；对于球体解离，超30年提供组织细胞解离整体解决方案的德国Nordmark产品因其温和并能保留干细胞的活性和多能性而成为良好的选择。

为了满足临床治疗和产业化需求，大规模生产需要确保每批次的hiPSCs都具有一致的质量，细胞的表型、增殖能力和分化潜能必须保持稳定，培养必须符合GMP标准。因此，一个可放大的稳健的悬浮生物反应器工艺对于满足hiPSCs临床生产的需求非常重要，而这要从按比例缩小的生物反应器模型的工艺开发和优化开始。

利用基因编辑技术对iPSCs进行基因改变的过程以实现特定的研究目的或临床应用。下面是几种常见的iPSC基因工程改造方法：

• CRISPR-Cas9基因编辑：CRISPR-Cas9是一种应用较广的基因编辑工具，可以进行基因敲除、插入或修饰等操作，从而改变iPSC的基因组结构。

• 转基因技术：利用转基因技术可以将外源基因导入到iPSC中。转基因技术可以用于表达特定的蛋白质、标记细胞或操控特定信号通路等。

• 病人特异性突变模型：利用CRISPR-Cas9或其他基因编辑技术，在iPSC中引入病人特异性的突变。这有助于研究特定遗传性疾病的发病机制，以及开发针对这些疾病的治疗策略。

• 基因表达调控：通过基因工程，可以在iPSC中调控特定基因的表达水平。例如，引入特定的启动子或沉默RNA（如shRNA或siRNA），可以增加或降低目标基因的表达。

iPSC分化是指将诱导多能干细胞引导分化成特定类型的成体细胞或组织细胞的过程。这种分化过程可以模拟人体发育过程中的细胞命运决定，从而产生不同类型的细胞，如心肌细胞、神经细胞、胰岛素产生细胞和肝细胞等。

在iPSC分化的过程中，可以利用特定的培养条件、生化小分子、生长因子、信号通路调控剂和细胞因子混合来引导干细胞朝向特定的细胞类型分化。

AXOL Bioscience在ISO9001:2015认证的生产设施中开发的高质量、一致性的功能性iPSC衍生细胞axoCells，提供的细胞类型主要包括：神经元、神经炎症细胞、心肌细胞和肌细胞，可用于开发药物发现和药物安全测试的体外模型。研究应用领域包括神经科学（如神经退行性疾病和神经炎症性疾病）、疼痛与感觉、心血管等，可用于推动强大的、可扩展的体外人类疾病模型。

细胞表征是指对培养中的iPSC进行描述和分析的过程。这有助于确定这些细胞是否真正具有干细胞特性以及其潜在的多能性。包括三谱系分化、人PSC功能鉴定、人PSC多色流式分析、人三胚层免疫细胞化学分析、人PSC标志物抗体检测等。

生物反应器是细胞疗法产业化中的核心技术。它们通过提供一个高度受控的环境，使得大规模细胞生产成为可能，为细胞治疗和再生医学提供了可靠的生产工具。

从小规模工艺开发到大规模临床和商业化生产，PBS Biotech垂直轮一次性生物反应器是异体细胞治疗的赋能技术，全系列生物反应器包括产品接触材料和软件，生产符合或优于cGMP质量和监管标准。

随着国内细胞与基因治疗行业不断向前发展，越来越多的客户已经进入临床研究&产品上市阶段，对制剂储存/灌装的需求逐渐增大。

多年前，美国Biolife Solutions集团旗下子公司Sexton Biotechnologies就提出了细胞制剂灌装及冻存的概念模型。如今，Sexton已开发出一系列与细胞制剂相关的灌装和存储设备，以实现细胞制造过程的灵活自动化和规模化，保证终端用户临床试验顺利进行，同时帮助客户减少产品误差和劳动力成本进而加速产品上市。

产品介绍：   • 低速、高速双泵设计   • 灌装灵活性高，支持冻存管、冻存袋灌装   • 符合GMP要求，安全性高   • 在C级实验室即可实现全封闭灌装   • 可实现525ml/min的灌装速度，可满足多数客户需求  应用学习：      👉🏻 技术速递——Sexton Signata CT-5灵活自动化细胞制剂灌装系统  👉🏻 Sexton CT5细胞灌装设备：一款CGT行业的“通用细胞管理系统”

细胞治疗最终制剂的活细胞药物由于自身的特殊要求，对其容器的材质、无菌性、耐用性、安全性等都有严格要求。美国Sexton品牌CellSeal无菌冷冻冻存管在低温冷冻存储条件下用于保证细胞治疗产品的安全低温保存和存储的性能。目前已被世界范围内的细胞治疗客户所应用，且已参与十几个国家40多种IND药物、2个上市药物（包括中国）的获批项目。

细胞制剂的冻存与复苏是确保细胞治疗成功的关键步骤。优化的冻存与复苏方法可以较大限度地保持细胞的活性和功能，为后续的临床应用提供高质量的细胞产品。在每个步骤中，严格的操作规范和质量控制至关重要，以确保最终的治疗效果。

另外iPSC来源的细胞模型也为疾病建模、药物筛选提供了人生理相关的体外模型，如iPSC来源神经元、心肌细胞、类器官和3D打印生物构建体等。随着细胞和细胞模型复杂性的不断增加，目的是提高它们的生理相关性。但问题在于，随着模型复杂性的增加，它们变得更难以培养且更脆弱。如果它们更脆弱，这意味着它们更难冷冻，且从供应商处或不同地点之间运送也更加困难。因此，需要更加有效的保存方式来解决冷冻物流的限制。

Atelerix 利⽤海藻酸盐⽔凝㬵技术，通过物理封装细胞、稳定膜完整性，使细胞在低温条件下处于 “休眠”状态并避免低温带来的细胞膜损伤，在运输过程中保持⽣物活性和功能，在⽆需冷冻的 情况下可保持⻓达两周的即⽤状态。