全血保存24h就“失效”？BloodReady水凝胶技术保障临床样本运输3天仍有95%活率

发布时间：2025/09/18 点击数：11

点击上图领取《BloodReady数据白皮书》

“刚采的全血得连夜送检测中心”、“多中心试验样本一半在路上就‘坏了’”、“某C品牌固定后，CD62L标志物直接‘消失’”—— 生物医药研究者的这些痛点，如今可被Atelerix的BloodReady全血保存技术克服。已发布的BloodReady白皮书数据显示，这款水凝胶封装技术，能让全血在2-8℃下稳定保存3天，关键免疫细胞活率、抗原表位及功能均媲美新鲜样本，填补全血样本“长时稳定+无损应用”的行业空白。

一、行业困局：全血研究3大痛点

全血样本的保存与运输，长期是临床诊断、药物研发的 “卡脖子” 环节，白皮书数据直指3大核心问题：

1、时效短到 “赶工”

• 新鲜全血采集后24小时内必须处理，超过时间嗜酸性粒细胞、中性粒细胞会选择性流失（白皮书引用研究证实，24小时后粒细胞损失超40%），后续免疫表型分析失真；

2、触达区域有限

• 由于区域和时效性，跨区域多中心试验中，偏远地区样本因断链风险几乎无法送达；

3、固定剂 “伤样本”

• 某C、某T品牌等传统固定剂虽能延长保存时间，却会破坏70%以上细胞表面抗原表位（如免疫分型关键标志物CD62L、CD317），不能很好地支持PBMC培养等下游功能实验。

二、BloodReady破局：3天稳定+4重数据，每一步都有实证

Atelerix团队以 “海藻酸盐水凝胶封装” 为核心，研发出 BloodReady技术，操作门槛低-无需专业设备，实验室人员即可完成封装，释放时仅需6mL柠檬酸盐缓冲液（40rpm摇床15分钟溶解），过滤后直接用于实验。以下4组关键实验数据，直接印证BloodReady其 “稳定+无损” 优势。

1、3天2-8℃保存，白细胞活率“反超”新鲜样本

使用33色面板测试了全血白血球群体在BloodReady中储存后的保存情况。多重染色方法使得可以全面划定免疫细胞群体，包括稀有免疫细胞亚群（可参考图2中展示的免疫细胞的层级结构）。全血样本来自4名健康志愿者，并在2-8°C条件下使用BloodReady保存3天。未储存的全血在第0天进行测试，随后在BloodReady中储存3天后再次测试。

初步评估白血球活性，比较未储存血液和BloodReady保存血液的差异，结果显示两者之间的活性白血球比例没有明显差异（见图1）。在未储存新鲜血液中，活性白血球占总CD45+群体的91.8%±1.4，而在BloodReady保存血液中，这一比例为94%±1.7。

使用BloodReady保存全血白血球活性

图1. 使用BloodReady保存全血白血球活性

首先，将白血球（CD45+）定义为总单细胞，然后使用LIVE/DEAD Fixable Blue Dead Cell Stain染色法识别活细胞或死细胞。

• a）活性CD45+细胞计数以总CD45+细胞的百分比表示。

• b）展示了一名健康志愿者的未储存血液和储存3天的BloodReady保存血液的代表性图。

通过多重流式细胞术抗体染色来界定免疫细胞亚群的层次结构

图2. 通过多重流式细胞术抗体染色来界定免疫细胞亚群的层次结构

2、主要细胞群和稀有的免疫细胞群都能得到很好的保存，33色抗体Panel验证稳定性

通过33色抗体Panel对保存后的全血进行精细免疫分型，数据显示：

（1）主要细胞群稳得住

• T细胞（CD3+）、B细胞（CD19+）、NK细胞（CD56+）比例分别为41.95%±4.65、11.40%±4.42、7.09%±2.43，与新鲜样本（37.60%±7.61、6.87%±2.39、5.53%±1.89）无明显差异（p>0.05）；

（2）稀有亚群不 “失踪”

• 调节性T细胞（Treg，CD25+CD127-/dim）、自然杀伤T细胞（NKT，CD56+）、γδT细胞等低比例亚群，3天保存后比例波动均＜0.3%，完全满足肿瘤免疫、自身免疫病等精细研究需求；

（3）仅粒细胞有差异

• 中性粒细胞、嗜酸粒细胞等粒细胞比例下降18.69%，证实该细胞类型对封装过程敏感，不影响其他核心免疫细胞应用。

使用BloodReady保存全血免疫细胞群体

图3. 使用BloodReady保存全血免疫细胞群体，主要细胞群和稀有的免疫细胞群都能得到很好的保存

首先将白血球（CD45+）定义为总单细胞，然后使用LIVE/DEAD Fixable Blue Dead Cell Stain染色法将其区分为活细胞和死细胞。

• a) 免疫细胞亚群以总活CD45细胞的百分比表示。

• b) T细胞（CD3+）被定义并细分为辅助性T细胞（CD4+）、细胞毒性T细胞（CD8+）、调节性T细胞（CD25+ CD127-/dim）、伽马δT细胞（TCRγδ+）和自然杀伤T细胞（CD56+）。

• c) B细胞（CD19+）被定义并细分为过渡期B细胞（CD27- IgD+）、未切换B细胞（CD27+ IgD+）和已切换B细胞（CD27+ IgD-）。

• d) NK细胞（CD56+ CD16+）被定义并细分为CD57+ NK细胞、早期NK细胞（CD56+ CD16-）和成熟NK细胞（CD56+ CD16+）。

• e) 单核细胞被定义为（CD4+ HLA-DR-）并细分为经典单核细胞（CD14+ CD16-）、中间单核细胞（CD14+ CD16+）和非经典单核细胞（CD14- CD16+）。

• f) 先天性淋巴样细胞（ILC）被定义为CD127+，并细分为ILC CD2+ CD4+和ILC CD2+ CD4-。

• g) 树突状细胞被定义为CD11c树突状细胞和CD123+浆细胞样树突状细胞。

• h) 粒细胞被定义为SSChi, CD15+ CD11b+细胞。

有关抗体面板，请参见下列附表1。

使用BloodReady保存全血免疫细胞群体的抗体面板

表1. 使用BloodReady保存全血免疫细胞群体。图3中描述的数据通过Wilcoxon配对符号秩检验（配对、非参数）进行显著性分析。无显著性（ns）= p > 0.05。

3、白血球90%+抗原表位留存，75%指标碾压某C牌

细胞群体的定义基于特定标记的存在或缺失及其表达水平。这在疾病状态下十分重要，因为白血球比例可能发生变化，或标记的表达失调。为了准确的临床诊断和监测，分析时细胞标记的表达必须能代表体内全血白血球的情况。因此，这一目标十分重要，因为研究表明，在未储存的全血中，细胞群体的区分随着时间推移而日益受限（2），这限制了采集后24小时内血液样本的使用。包括某C、某T品牌和福尔马林等固定试剂可以延长全血在流式细胞分析前的储存时间，但它们也可能对标记的表达产生不良影响。

白皮书中研究了BloodReady与某C品牌相比，保持血液白血球表面关键表位的能力。针对93种白细胞表面标志物的专项检测，揭开BloodReady的 “无损表位” 优势：

（1）细胞类型几乎全覆盖

• 淋巴细胞表面＞90%表位、单核细胞＞80%表位、粒细胞＞70%表位的表达量，优于对照组（比值接近0，代表无差异）；

（2）关键标志物更稳定

• 对冻存敏感的CD62L、免疫分型核心的CD317、CD82等标志物，BloodReady保存率超 95%，而某C品牌保存后这些标志物信号下降50% 以上；

（3）数据硬对比

• 75%的检测指标（如整合素β7、CD367）保存效果优于某C品牌，避免 “固定后标志物丢失” 导致的诊断误差。

使用BloodReady保存全血白血球表位表达

图4. 使用BloodReady保存全血白血球表位表达

全血在BloodReady或某C品牌中储存3天后，使用93种抗体面板对白血球表面表位进行染色。表位表达与未储存的全血白血球对比，结果以比率形式表示，其中0表示未储存。对白血球表位表达进行分别分析，a) 淋巴细胞，b) 单核细胞，和c) 粒细胞亚群。d) BloodReady在保存若干淋巴细胞表位上比Cyto-Chex更有效，包括CD62L、CD317、CD82、CD367和整合素b7。数据显示为n=3名健康供体的平均值。有关抗体面板可参见白皮书附表2。