InSphero 在 2025 年宣布收购了 DOPPL SA，同时获得了其背后的 Sun Bioscience 的 Gri3D 类器官培养技术。此次收购的核心目的，是把 InSphero 原本擅长的“3D spheroid（球体）+器官芯片”体系，与 Gri3D 的“高一致性类器官培养”能力整合起来，形成更完整的 3D 体外模型系统。
Gri3D 水凝胶微腔板是一种基于 PEG 水凝胶微腔技术的即用型 3D 细胞培养，可用于高通量、标准化和可重复的类器官及球状体培养，它具备以下优势：
预成型且可直接使用，采用细胞排斥性的 PEG 水凝胶 U 形微腔设计，可促进细胞在微腔内自然聚集，稳定形成大小均一、可控的类器官和球状体，从几十到数千个细胞均可准确控制。
图/outlook：预成型且可直接使用的Gri3D 水凝胶微腔板，高一致性的类器官形成
基于标准 96 孔板设计（可选透明或黑色），每孔可包含 31–121 个微腔阵列，底部可选聚苯乙烯（生化或裂解分析）或COP（高内涵成像）材质，实现灵活的实验设计，兼容 ANSI/SLAS 与 SBS 标准，可无缝接入自动化液体处理及高内涵筛选系统，满足大规模实验需求。
图：Gri3D 水凝胶微腔板透明或黑色；微腔直径范围为 400 至 800 µm，每个孔形成 31 至 121 个微腔，可实现灵活的实验设计；根据您的需要选择底部材质：聚苯乙烯材质适用于生化或裂解分析，COP材质适用于高内涵成像应用。
3D成像变得更加容易。水凝胶含水量超过 95%，具有高度透明性，可有效减少光折射和成像畸变；同时所有类器官位于统一成像平面，适合高分辨率共聚焦成像和高内涵定量分析。
图/outlook：由Gri3D 板培养的肠道类器官成像
独特的移液端口设计可在培养基更换过程中保护类器官，避免组织丢失，支持长期培养及单个类器官的动态追踪，同时兼容手动和自动化操作。
图/outlook：Gri3D 板移液端口可实现安全的培养基交换而不会丢失您珍贵的类器官
无需复杂的水凝胶制备或专业操作，研究人员只需进行细胞接种、培养和分析即可快速开展 3D 类器官实验，提高实验效率与可重复性。
InSphero收购DOPPLSA&SunBioscience的Gri3D培养技术后，更夯实了其在三维细胞模型领域的地位。如果您对Gri3D感兴趣，欢迎直接联系我们或在曼博生物-InSphero 3D培养资源中心获取更多资料（点击获取），帮助您熟悉该产品，从而更好地应用于您的3D研究流程中。
这些资源包括但不限于Gri3D的常问问题（FAQ）、产品手册、操作指南、应用说明合集及文献（含一篇炎症性肠病IBD的研究）等。
Gri3D 是一种基于 PEG 水凝胶微腔（Hydrogel Microcavity）的 3D 细胞培养板，可在微腔中形成大小相对均一的类器官或球状体，并适用于成像、药物筛选及多种下游分析。
收到产品后，建议将 Gri3D 置于 4°C 保存。
在 4°C 条件下，未开封的 Gri3D 具有至少 6 个月的稳定性。
Gri3D 不同部件采用不同材料：
PEG 水凝胶具有细胞惰性，可为细胞聚集和类器官形成提供无基质的三维培养环境。
Gri3D 提供不同尺寸的微腔，直径范围约为 400–800 μm。
微腔尺寸主要根据类器官的类型、大小和培养时间进行选择。
如果类器官较小，或者从较少的细胞数量开始培养，可以选择较小的微腔，以获得更高的微腔密度和更多数据点；如果计划培养更长时间或获得更大的类器官，则可以选择较大的微腔。
可以。Gri3D 可以用于建立自动化类器官培养流程，包括：
这些步骤可以与液体工作站等自动化设备结合使用。
每个孔推荐：
总操作体积为 200 μL。
Gri3D 已用于多种类器官模型，包括：
具体应用还需要根据细胞类型和培养条件进行优化。
每孔使用 50 μL 单细胞悬液进行接种。
具体细胞密度需要根据细胞增殖速度、类器官类型以及期望的最终类器官大小进行优化。通过调整初始接种密度，可以控制类器官的最终大小。
Gri3D 特殊设计的接种环可以减少液体弯月面效应对细胞分布的影响，使细胞更加均匀地进入微腔。
同一个孔内不同微腔之间的细胞数量差异通常小于 5%。
形成时间取决于：
通常需要约 2–5 天，细胞才能充分聚集形成紧密结构。
Gri3D 可以形成大小较为均一的类器官/球状体，实际尺寸仍会受到细胞自身生物学特性的影响。
类器官或球状体可以根据实验需求进行长期培养。
例如，资料中提到：
具体培养时间需要根据模型进行优化。
可以。
不同细胞类型可以在接种前混合后共同接种，也可以在类器官形成后加入第二种细胞，例如加入免疫细胞进行共培养。
资料中展示了血脑屏障类器官共培养和 T 细胞杀伤实验等应用。
使用 Gri3D 特殊设计的 Pipetting Port（移液区域）进行培养基更换或化合物处理，可以减少对微腔中类器官的扰动。
通常从移液区域移除 150 μL培养液，再加入相同体积的新培养液即可。
培养基更换频率取决于细胞类型和具体培养方案。
一般可以每 2–3 天更换一次，也可以根据实验需求进行更频繁的更换。
是否需要添加 ECM 取决于具体的类器官模型。
对于需要在基底膜提取物（BME）中扩增的类器官，可以将 ECM 与培养基混合，以支持类器官的 3D 生长。例如使用 Matrigel 时，通常需要在每次换液时加入约 1.5–2% Matrigel。
Gri3D 可以兼容多种能够与培养基混合稀释的 ECM，包括：
具体使用浓度需要根据类器官模型进行优化。
不需要。
PEG 水凝胶本身具有细胞排斥特性，因此细胞接种前无需对培养板进行额外包被。
不需要。
Gri3D 可以通过一次移液完成细胞接种和聚集，无需离心。特殊的接种环设计有助于实现均匀的细胞分布。
可以。
不同孔可以用于不同实验，但需要确保未使用的微腔始终保持水凝胶水合状态并维持无菌条件。再次使用前应检查微腔是否仍然保持水合。
不建议。
厂家不建议在清洗后重复使用 Gri3D，因为无法保证重复使用时的产品质量。
PEG 水凝胶比较敏感。如果移液枪头直接扰动水凝胶，可能损坏微腔结构，从而导致类器官丢失。
类器官形成后，可以直接在 Gri3D 上进行多种检测，例如：
可以根据具体实验选择合适的检测方法。
可以。
固定、通透、封闭、抗体孵育以及成像等免疫荧光实验步骤均可以直接在 Gri3D 上完成。
可以。
Gri3D 支持：
类器官被限制在微腔内并保持在相对一致的焦平面，因此可以同时对多个类器官进行成像，有利于建立效率的图像分析流程。
适合。
Gri3D 采用 SLAS 标准 96 孔板规格，每个孔可以形成多个类器官，并且类器官处于相对一致的焦平面，因此适合建立基于成像的类器官筛选和药物筛选流程。
可以进行荧光和比色（O.D.）检测。
由于 Gri3D 本身是透明的，为获得更好的检测效果，厂家建议将样品转移至适合检测的白孔板或黑孔板中进行检测。
可以使用多种细胞活力检测方法，例如：
不会。
资料显示，CellTiter-Glo 3D 的检测体系不会对 PEG 水凝胶产生影响，因此水凝胶不会干扰该类发光检测。
可以。
可以通过 Pipetting Port 安全地采集培养液，并用于下游分析，例如质谱（MS）检测。
由于类器官是在开放式、无实体基质的微腔环境中生长，因此可以通过简单移液直接从微腔中收获类器官，无需复杂的基质去除步骤。
收获后，可以进行传代或其他下游分析。
一般不会。
PEG 是细胞惰性材料，可以在类器官离心后去除。
可以。
收获类器官后，可以按照实验室现有方法进行 DNA、RNA 或蛋白提取。如果单个孔中的类器官数量或体积不足，可能需要合并多个孔的样品。
可以。
由于类器官生长在开放式、无实体基质的微腔中，可以从指定微腔中单独挑取类器官，用于后续分析。
可以。
样品可以在微腔中进行固定和冷冻保存，随后将包含类器官的水凝胶取出，包埋于 OCT 中并进行快速冷冻和冷冻切片。
大多数情况下不会发生明显结合。
不过，PEG 可能与含巯基（thiol group）的分子发生结合，因此对于特定化合物，建议结合具体分子特性进行评估。
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