Cell-free技术如何革新蛋白表达？交给eProtein Discovery无细胞蛋白表达筛选系统

摘要：eProtein Discovery系统依托Cell-Free System结合数字微流控技术，实现无细胞蛋白表达筛选自动化，稳定制备难表达蛋白，可咨询曼博生物获取服务详情。

关键词：蛋白表达系统,Cell-Free System,nuclera,eProtein Discovery系统,无细胞蛋白表达,无细胞蛋白合成,数字微流控蛋白筛选,难表达蛋白

在蛋白科学和药物研发领域，快速获取有活性的目标蛋白是核心挑战，特别是传统细胞系统难以表达的蛋白。无细胞蛋白表达系统（Cell-Free System）凭借独特优势解决这一问题，英国nuclera的eProtein Discovery系统，更是借助该技术实现了无细胞蛋白表达筛选的高通量和自动化。

一、eProtein Discovery系统：无细胞蛋白表达台式解决方案

eProtein Discovery系统是集成化的台式解决方案，核心基于无细胞蛋白合成技术，无需依赖活体细胞的培养、转染等流程，直接在体外混合体系完成从DNA到蛋白的转录与翻译。

系统采用三步全自动化工作流程，操作便捷且快速：

相较传统蛋白表达方法，该系统基于Cell-Free System展现出多重实用优势：

1. 制备周期大幅缩短：将传统数周甚至数月的蛋白获取周期，缩短至2天；

2. 反应条件灵活可控：配备多种即用型添加剂，适配不同蛋白的表达需求

·氧化还原调节剂（PDI/GSSG、GSSG）：促进二硫键正确形成，适配抗体、细胞因子等蛋白；

·分子伴侣（DnaK Mix、TrxB）：防止蛋白聚集，助力蛋白正确折叠；

·金属离子与辅因子（Zn²⁺、Mn²⁺、Ca²⁺及NAD、乙酰辅酶A等）：为金属酶、辅因子依赖型蛋白提供活性中心环境；

·原位标签切除酶（3C蛋白酶）：表达时同步切除可溶性标签，直接获得天然N端蛋白。

3. 应用范围广：成功表达跨膜蛋白、含多二硫键蛋白、转录因子、激酶等多种难表达蛋白；官方实测数据显示，系统已制备超2000种蛋白，其中约77%为人类蛋白。

A1：核心区别在反应环境。传统系统依赖完整活体细胞及内部调控网络；无细胞系统提取细胞的转录、翻译核心组分（核糖体、酶、tRNA等），在试管中重建蛋白合成过程，环境更简单、开放且调控灵活。

A2：特别适合传统细胞系统中难以表达的蛋白，包括：可结合纳米盘技术的跨膜蛋白、需形成多个正确二硫键的蛋白、对细胞有潜在毒性的蛋白，及需快速筛选多种变体（突变体、截短体、同源物）的蛋白。

A3：可以。系统制备的蛋白已成功应用于酶活性测定、生物分子相互作用分析、抗体结合验证，还可作为样品用于冷冻电镜结构解析。

A4：上海曼博生物医药科技有限公司是nuclera官方合作伙伴，为中国大陆用户提供eProtein Discovery系统的产品咨询、采购安装、技术支持等全流程服务。

nuclera eProtein Discovery系统是Cell-Free System在无细胞蛋白表达领域的自动化升级成果，通过高通量筛选、灵活的条件配置与快速放大生产，大幅缩短蛋白获取周期，提升难表达蛋白的制备成功率。点击访问了解更多无细胞蛋白表达、无细胞蛋白合成相关应用信息(https://www.mine-bio.com/nuclera/)。

本文基于nuclera公开资料由其中国提供商上海曼博生物整理，仅用于科研信息分享。上海曼博生物可提供eProtein Discovery系统、无细胞蛋白表达筛选系统、Cell-Free System蛋白表达解决方案及难表达蛋白快速制备相关产品与技术支持。

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