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HiPSC培养与扩增支持

了解 iPSC 及干细胞相关培养问题。围绕 iPSC 培养、细胞状态、培养基选择及日常维护等常见问题提供技术参考。（可点击下方“下载资料”查看更多信息）

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产品信息

人诱导多能干细胞（Human Induced Pluripotent Stem Cells，HiPSC）具有自我更新和多向分化潜能，多用于疾病建模、药物研究及细胞分化等领域。

与常规细胞培养相比，HiPSC对培养基、细胞外基质、传代方式及培养环境更加敏感。以下整理Cell Applications HiPSC培养和使用过程中常见的问题。

1. HiPSC培养和普通细胞培养一样吗？

不完全相同。

HiPSC在未经处理的普通塑料表面上贴附和生长较差，因此通常需要在接种前使用适合的细胞外基质进行培养器皿包被。

此外，HiPSC培养基中含有对温度较敏感的细胞因子，因此培养基通常建议恢复至室温后使用，而不是长时间放在37°C水浴中预热。

Cell Applications的HiPSC可通过对人真皮成纤维细胞（Human Dermal Fibroblasts，HDF）进行遗传重编程获得。

对于特定供体、遗传突变或疾病背景，还可根据项目需求进行定制化HiPSC建系。

Integration-Free HiPSC，即无基因组整合型iPSC，是指重编程过程中不将重编程载体或相关转基因序列永远整合进入宿主细胞基因组。

Cell Applications采用Sendai virus等方式进行重编程。Sendai virus属于RNA病毒，其生命周期不经过DNA阶段，因此可以降低随机整合外源遗传物质的风险。

用于重编程的Sendai virus为复制缺陷型。

随着HiPSC不断分裂和传代，病毒水平会逐渐下降。但在较低传代次数的细胞中，仍可能检测到残留病毒。

进行HiPSC培养时，实验人员仍应按照规范的细胞培养和生物安全操作要求开展实验。

HiPSC在长期培养过程中可能出现染色体获得、缺失或易位等核型异常。

因此，核型检测是HiPSC质量控制中的重要环节，可帮助判断实验中观察到的细胞表型是否可能受到染色体异常影响。

Cell Applications建议控制HiPSC的长期传代，并在培养过程中定期进行核型检查。

HiPSC的生长速度并不是固定值。

其生长动力学会受到多种因素影响，包括：

因此，与普通稳定细胞系相比，单独使用一个固定的doubling time并不能完整反映HiPSC的生长状态。

HiPSC培养应选择专门针对多能干细胞设计的培养体系。

Cell Applications提供Human Induced Pluripotent Stem Cell Growth Medium，同时配套HiPSC培养器皿包被试剂。

如果需要更换为其他厂家的培养基，建议通过若干代培养逐步适应新的培养体系，避免突然改变培养条件对细胞状态造成影响。

ROCK是Rho-associated protein kinase的简称。

Y-27632是HiPSC培养中常见的ROCK抑制剂，可用于改善细胞在解离、传代或单细胞接种后的存活情况，因此常用于HiPSC复苏和传代阶段。

HiPSC大规模培养不仅需要关注最终细胞数量，还需要关注：

批次一致性、培养操作次数、污染风险以及质量控制。

Cell Applications提供按需进行的HiPSC扩增服务，可实现同一批次细胞的大规模扩增，适合对批次一致性和细胞数量有较高要求的研究项目。

实际培养过程中，建议重点关注以下因素：

培养基选择 → 基质包被 → 细胞复苏 → ROCK抑制剂使用 → 传代比例 → 克隆形态 → 培养代次 → 核型检测

其中任何一个条件发生明显变化，都可能影响HiPSC的生长状态和后续分化表现。

如果您在使用Cell Applications HiPSC产品过程中遇到：

HiPSC复苏、培养基选择、基质包被、传代、细胞形态、扩增、核型检测或后续分化等问题，可联系曼博生物技术团队获取相关产品资料和培养支持。