一、前言

在生命科学的微观世界里，细胞培养技术的每一次突破，都如同点亮一盏明灯，为医学发展开辟新的道路。间充质基质细胞（MSCs）作为免疫调节和再生医学领域的 “潜力股”，备受科研人员和临床医生的关注。它在治疗移植物抗宿主病、自身免疫性疾病以及组织修复等方面展现出巨大的潜力，各项临床试验也正如火如荼地开展着。

原代MSCs通常是从骨髓、脂肪或脐带等多种组织中分离获取，但获取原代MSCs时，面临着供体差异和来源有限的问题。为解决这些局限，从诱导多能干细胞（iPSCs）中获取MSC样细胞（iMSCs）的方法应运而生，这种方法提供了一种可再生、标准化的细胞来源，有助于提升实验的可重复性，帮助推动MSCs在临床中的应用。

图1. LN521支持体外iPSC-MSCs生成和原代MSCs的增殖及下游分化

MSCs的特性和功能受微环境影响，细胞外基质（ECM）中天然存在的层粘连蛋白521十分关键。全长层粘连蛋白在体内干细胞微环境中发挥结构和功能作用，促进细胞特性稳定、自我更新能力和存活。BioLamina全长重组人Biolaminin 521是一种化学定义的培养基质，能够模拟体内微环境，促进原代MSCs增殖，还可支持iMSCs体外培养，有利于iMSCs从生成到下游分化的过程标准化，推进MSCs的相关临床应用。

图2. LN521是体内/外培养MSCs的天然细胞外基质

二、Biolaminin 521应用于MSCs培养的真实表现

1、原代MSCs细胞稳定、均匀且快速增殖

人原代脂肪来源的MSCs（Ad – MSCs）在Biolaminin 521上培养，生长速度比在不包被或包被其他底物上更快且形态更加均匀，细胞活力也有所提高。

具体来说，在无异种培养体系条件下，（图3 A）使用含5%hPL的培养基包被LN521（橙色线）或不包被底物（蓝色线），以及（图3 B）使用市售商业化培养基包被LN521（橙色线）或其他基质（蓝色线）时，对比人原代Ad-MSCs的生长速率，两组结果均显示，在LN521包被的培养皿上的MSCs增殖更快。并且，在传代3代后，市售培养基中包被其他基质底物上培养的MSCs细胞无法维持，出现死亡。

另外，原代Ad-MSCs在LN521组或无包被基质组上培养的明场图片显示，在无异种培养条件下（分别为第4天和第5天），LN521组别的MSCs形态与无包被基质组的MSCs形态对比，细胞分布更为均匀。

图3. 无异种培养体系中LN521支持原代细胞稳定且均匀的扩增

（数据由Claudia Lobato Lab提供）

在对Ad-MSCs 的培养进一步探索发现，使用两种无异种培养基，分别对比包被Biolaminin 521与不包被基质的 FlexiGrow™ Carroucell 微载体上培养的Ad-MSCs（p3）的培养效果，在LN521上MSCs的生长速度相较于未包被基质的相同微载体提升了2.27 - 3.65倍，并且细胞活力也提高了10 - 20%。

图4. 在无异种培体系中原代Ad-MSCs在生物层521上的大规模扩张

（数据由Carroucell生成）

2、全长Biolaminin521支持iMSC生成及下游分化

Biolaminin521可支持iMSC 的生成，能让 iPSCs 来源的 iMSCs 快速稳定增殖，缩短传代间隔，并可帮助下游细胞分化效率更一致。

从数据上看，比较市场上各类常见的细胞培养基质产品对iPSC生成MSCs的支持作用及培养效果（图5 A），结果显示，全长LN521允许iPSC衍生的MSCs快速和稳定的增殖，缩短传代间隔时间（p1至p10）。特别是与片段的层粘连蛋白511相比，全长LN521的有益优势更明显。

图5. 全长LN521支持iPSC衍生MSCs的生成且快速增殖

进一步对细胞分化方面进行评估，LN521确保了iMSCs向成骨细胞的均匀分化，并且与其他对照组相比，增加了钙磷沉积。（图6-B的条形图显示了分化28天后的染色定量）

图6. 全长LN521支持iMSCs均匀且有效的成骨细胞分化

三、Biolaminin521培养MSCs优势总结

总的来说，LN521 具备独特特点。它能模拟细胞微环境，有利于原代MSCs细胞的分离及培养。从基础研究到临床应用的过程中，使用LN521 能实现顺利过渡。Laminins是细胞外基质中的基底膜蛋白，全长Laminins在体内干细胞微环境中发挥着结构和功能作用，全长重组人源Biolaminin 521 作为一种化学成分明确的培养底物，可模拟体内微环境，可帮助MSCs相关的培养及无异种培养体系的规模放大，以更好的帮助MSCs的临床应用，为生物医学的发展助力。

参考资料

Next generation mesenchymal  stromal cell culture with Biolaminin 521

（了解更多详细信息及获取原文件，请联系上海曼博生物！）

让我们共同关注细胞治疗领域的发展，期待更多突破！

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