一、前言

在前两篇文章《干细胞研究与应用的关键要素》和《521 CTG 细胞培养优选方案》中，我们介绍了全长的Laminin 521在原始细胞生态位的重要组成作用、实际出色的培养效果及良好的产品资质。本文，我们就BioLaminin 521在实际应用场景中可兼容的培养容器类型展开叙述，以更好的帮助科研人员在干细胞培养时找到适合研究目的包被底物。

在生命科学研究与细胞培养制造领域，选择合适的细胞培养底物尤为重要。BioLamina公司的Biolaminin系列产品，为各种细胞培养场景提供了多样化、可信赖的解决方案。

二、一种细胞培养底物适应多种细胞培养形式

•  有众多科学研究验证，Biolaminin有助于稳定的干细胞培养过程

•  研究级laminin和细胞治疗级（CTG）laminin，能满足科学家不同阶段的需求

•  细胞治疗级CTG521成分明确，不含动物源成分，符合临床阶段各项监管要求

•  全长Biolaminin对细胞培养的有益作用，可应用于多种培养形式，从微孔板到大规模扩增的培养方式，适用于玻璃、金属等多种材料，在成像系统及细胞模型构建等环节均能发挥作用

三、BioLamina产品在研究和生产的实际应用

1、细胞微孔板(Microtiter plate)

Biolaminin 521可为人多能干细胞（hPSC）实现可靠的自动化成像工作流程（例如基因编辑场景）。使用高内涵图像分析系统评估，在96孔板中，与基质胶（Matrigel）、玻连蛋白（vitronectin）和纤连蛋白（fibronectin）相比，在LN521上进行基因编辑时人类诱导多能干细胞（hiPSC）具有良好汇合度。

另外，研究96孔或384孔板中培养的LN521上的人类多能干细胞克隆，产生的克隆中近100%的细胞保留了多能性标记物，并且具有经典的集落形态（另见原文文献，可联系我们获取）。

LN521支持iPSC良好汇合度

2、细胞培养瓶（flask）

Biolaminin 521可支持诱导多能干细胞（iPSC）扩增和后续分化，兼容无动物源性且成分确定的培养方案。

A）对重编程后的iPSC进行多能性标记物（OCT4、NANOG、SSEA-4）的表达进行染色（比例尺100μm）。

B）通过拟胚体（EB）形成实验所证实的多能性，在第21天对胚层标记物进行逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）。

LN521支持flask中培养hiPSCs的多能性和EBs三系分化能力

3、中空纤维（Hollow fiber）

Biolamin 521是用于大规模扩增的优选底物。在配备有包被了LN521的多孔中空纤维（由聚芳醚砜（PAES）、聚乙烯吡咯烷酮（PVP）和聚酰胺（PA）聚合物组成）的Quantum扩增系统中，进行诱导多能干细胞（iPSC）的扩增，与Vitronectin相比，实现了以下效果：A）细胞数量增加；B）群体倍增增加。

并且，维持了多能性、核型，以及向三个胚层分化的能力（另见原文文献，可联系我们获取）。

LN521较Vitronectin更支持中空纤维柱中iPSC的扩增

4、微载体（Microcarrier）

Biolaminin 521对微载体（MC）进行包被，能在搅拌条件下有效地支持人类胚胎干细胞（hESC）的附着和铺展，且无需额外的正电荷（聚赖氨酸（PLL）或阳离子修饰聚苯乙烯（Plastic Plus））。

数据显示，无论是否有额外的正电荷，经Biolaminin 521包被的微载体，其铺展效率都很高，圆形、部分铺展和完全铺展的细胞占比在83%至88%之间，而相比之下，没有额外电荷时，LN111（包被的微载体）的这一比例仅为13%至16% 。

PS = 无孔聚苯乙烯微载体；Plastic = 多孔交联聚苯乙烯微载体。

LN521包被微载体支持搅拌条件下3D培养iPSC

四、总结：为何使用BioLaminin

•  高生物相关性支持细胞真实活动：Biolaminin让细胞在培养中更接近体内真实状态。

•  高增殖性并保持细胞完整性：支持应用低传代细胞系产生具有临床意义数量的细胞。

•  高批次间一致性利于标准化实验：多能性基因表达模式统一，减少实验中的差异。

•  高分化效率：促进细胞分化、成熟，帮助形成肝、心肌及神经元等特殊细胞类型。

•  成分明确适用于无血清培养体系：为不含动物源成分的重组蛋白。

•  资质良好成分具完整可追溯性：细胞治疗级CTG521可提供动物源声明、分析证书和安全数据表等质量文件，满足IND项目临床阶段监管需求。

五、展望

BioLamina公司的层粘连蛋白产品凭借其生物学相关性、高扩增率、批次稳定性、促进细胞分化、无动物源成分以及适用性广等诸多优势，为生命科学研究和细胞治疗领域带来了新的突破和发展机遇。随着科技的不断进步和对细胞培养技术要求的日益提高，其有望在更多领域发挥重要作用，推动整个生命科学产业的发展，为人类健康事业做出更大的贡献。

六、参考资料

BioLamina products in research and manufacturing

(了解更多详细信息及获取原文件，请联系上海曼博生物！)

让我们共同关注细胞治疗领域的发展，期待更多突破！