重组人激活素Activin E常见问答FAQ：代谢研究如何检测蛋白活性？

摘要：详解Activin E功能、通路与定位，有无标签对比Qk067/Qk082活性，介绍Qkine激活素系列产品。

关键词：ActivinE、Qk067、ALK7、INHBE、药物代谢研究、TGF-β、激活素E、蛋白活性检测、激活素、活性检测方案

1.Activin E是一种细胞因子吗？

Activin E通常不被归类为细胞因子，而是属于转化生长因子-β（TGF-β）超家族。虽然它具有与细胞因子类似的信号传导功能，但更准确地说，它应该被描述为TGF-β家族中的一种生长因子。

2.Activin E 与什么结合？

Activin E主要与激活素受体样激酶7 (ALK7)（也称为ACVR1C）结合。该受体是TGF-β信号通路的一部分，并在包括脂肪组织在内的多种组织中表达。当Activin E与ALK7结合时，会启动一系列信号级联反应，从而影响代谢过程，例如调节脂肪组织功能和能量稳态。这种相互作用在控制脂质代谢和胰岛素敏感性方面尤为重要。

3.Activin E 基因有什么作用？

Activin E 基因，又称 INHBE，编码 Activin E 蛋白。

4.什么是Activin E？

Activin E 是一种属于 TGF-β 超家族的蛋白质，参与炎症、代谢和肌肉生长的调节。

5.什么是Activin E通路？

Activin E通路是TGF-β信号通路的一部分，其涉及Activin E与其受体（主要是ALK7，即激活素受体样激酶7）的结合。结合后，ALK7发生磷酸化，激活细胞内信号级联反应，特别是SMAD蛋白。这些SMAD蛋白随后转位至细胞核，在那里调节参与脂质代谢、脂肪组织功能和能量稳态等代谢过程的靶基因的表达。

6.Activin E存在于哪里？

Activin E主要在肝脏中表达，并参与多种代谢过程，包括葡萄糖和脂质代谢的调节。此外，在脂肪组织和胃肠道中也检测到了Activin E。

7.Qkine 的Human Activin E（Qk067）如何检测活性？

采用Smad报告基因检测法，在共转染了Activin E共受体ALK7的HEK293细胞中测定重组Activin E PLUS的活性。如下图，Qk067 （此批号为204646）的EC50 = 0.16 ng/ml (6.8 pM).

我们在文末附上了详细的活性检测实验方案供参考，该方案来自Qkine厂家。

图：Human Activin E（Qk067）的活性

8.Qkine 的Human Activin E (Avi-tag) (Qk082)是什么？

人重组 Activin E PLUS (Avi-tag) 蛋白是经过优化的、具有生物活性的成熟人 Activin E 蛋白结构域截短体，在N端带有 Avi-tag，一方面便于生物素化，另一方面是为了尽量减少干扰受体结合的可能性。

Qk082 Activin E (Avi-tag) 是高纯度 27.2 kDa 二聚体，不含动物源性成分 (AOF) 和载体蛋白 (CF)。

9.Human Activin E (Avi-tag) (Qk082)与Human Activin E（Qk067）相比，活性如何？

如下图，使用Smad报告基因检测法测定重组Activin E PLUS在HEK293细胞中的活性，该细胞共转染了Activin E共受体ALK7。将细胞用系列稀释的Activin E PLUS（Qk067，黑色）或Activin E PLUS （Avi标签）蛋白（Qk082，绿色）处理 6小时，每个处理设置三个复孔。测定萤火虫荧光素酶活性，并以对照海肾荧光素酶活性进行标准化。Qk082批号204688 EC50 为1.0 ng/ml ( 37 pM )，Qk067批号204646 EC50 为68 pg/ml ( 2.9 pM )。尽管在下游检测中需要添加 Avi 标签，但给 activin E PLUS添加标签却降低了其生物活性。这凸显了仅在蛋白质具有功能且必要时才添加标签的重要性。

图：Human Activin E (Avi-tag) (Qk082)与Human Activin E（Qk067）的活性对比

10.Activin E 系列有哪些产品？

目前有：

• Human activin E PLUS (Avi-tag) protein (Qk082)

• Mouse activin E PLUS (Avi-tag) protein (Qk008)

• Human activin B protein (Qk024)

即将推出：

• human activin AB protein (Qk127)

• human activin AC protein (Qk128)

• human GDF-8 (myostatin) protein (Qk124)

附：Human Activin E（Qk067）活性检测实验方案。

HEK293 cells (ATCC) were cultured at 37 °C with 5% CO₂ in Dulbecco’s Modified Eagle Medium (DMEM; Gibco #31966047) supplemented with 10% fetal bovine serum (FBS; Thermo Fisher Scientific #10500064). Cells were plated onto poly-L-lysine–coated 96-well plates (Corning #353072) at a density of 1 × 10⁴ cells per well and allowed to adhere for 24 hours.

Cells were then transfected using FuGENE HD (Promega #E2311) with pGL3-CAGA12-luc (42 ng/well), pRL-TK (8 ng/well), and pcDNA3-ALK7 (2 ng/well). Co-transfection with pRL-TK enabled constitutive Renilla luciferase expression for normalization.

Twenty-four hours post-transfection, Activin E was reconstituted in 10 mM HCl and subsequently diluted in DMEM containing 0.5% FBS before being added to the cells in triplicate. Plates were incubated for 6 hours at 37 °C, after which the media was removed and cells were lysed using Passive Lysis Buffer (Promega).

Firefly and Renilla luciferase activities were measured using a FLUOstar Omega plate reader (BMG Labtech). Firefly/Renilla ratios were calculated and plotted against protein concentration, with curve fitting performed using a four-parameter logistic model in GraphPad Prism 10.

扩展阅读

1.Qkine｜ Activin E（Qk067）激活素E：https://www.mine-bio.com/Qkine-article/Qkine-article-19.shtml

2.Qkine Activin B（Qk024）激活素B｜代谢疾病研究：https://www.mine-bio.com/Qkine-article/Qkine-article-32.shtml

本文基于Qkine公开资料由其中国官方直售提供商上海曼博生物整理，用于科研信息分享和产品解惑答疑。上海曼博生物中国直售提供Qkine Activin E蛋白（Qk067、Qk082）、激活素系列蛋白及相关蛋白活性检测解决方案产品，支持代谢研究、TGF-β信号通路研究及相关应用。